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C-terminus of RNase H contributes to hepatitis B virus genome replication

Other Title
B형간염 바이러스 RNase H의 C-말단이 바이러스 증식에 미치는 영향
이, 혜진
대학원 의생명과학과
Master (2015)
Table Of Contents
차 례

국문요약 ⅰ

차 례 ⅲ

그림 차례 ⅴ

Ⅰ. 서론 1

A. B형 간염 바이러스 1

B. B형간염의 역학 및 증상 2

C. B형간염 바이러스의 증식 2

D. B형간염 바이러스의 중합효소 3

E. 연구목적 4

Ⅱ. 재료 및 방법 6

A. HBV polymerase mutants 제작 6

ⅰ) Basic constructs 6

ⅱ) Tagging constructs 7

ⅲ) Point mutation constructs 7

ⅳ) Splicing constructs 8

ⅴ) Alanine substitution constructs 9

B. 세포 배양 및 transient transfection 13

C. SDS-PAGE gel 전기영동과 Western blotting 13

D. Core particles 분리 14

E. Native agarose gel 전기영동과 Western 및 nucleic acid blotting 14

F. DIG(digoxigenin-UTP) RNA labeling과 HBV minus-stranded DNA 15

G. Southern blotting 16

H. RNase protection assay(RPA) 17

Ⅲ. 결과 18

A. HBV RNase H의 C-말단과 DHBV RNase H의 C-말단을 치환한 mutant의 바이러스 증식과 발현 18

B. HBV polymerase RNase H domain의 L804D mutant의 바이러스 증식 감소, 특히 RC DNA 합성의 결함 23

C. HBV polymerase RNase H domain의 Q809P mutant의 바이러스 증식 감소 26

D. T812P, G813L 과 R814S mutant들의 바이러스 증식 손상과 T815K mutant의 바이러스 DNA 합성의 결함 29

E. HBV polymerase RNase H domain의 A819I mutant의 바이러스 증식 감소 33

F. DNA 감소를 보인 L804D, L806T, Q809P, P810Y, T812P, G813L, R814S, T815K 그리고 A819I mutant들의 pgRNA encapsidation 36

G. HBV polymerase RNase H domain에서 L804, F808, Q809, T811, T815, L817 그리고 Y818 잔기의 alanine 치환 38

Ⅳ. 고찰 42

Ⅴ. 결론 45

참고문헌 46

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Theses > Graduate School of Biomedical Sciences > Master
AJOU Authors
이, 혜진
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