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Cytotoxicity and DNA cleaving activity of Anti-DNA Autoantibody

DC Field Value Language
dc.contributor.author이, 은정-
dc.date.accessioned2011-03-07T06:12:56Z-
dc.date.available2011-03-07T06:12:56Z-
dc.date.issued2006-
dc.identifier.urihttp://repository.ajou.ac.kr/handle/201003/1574-
dc.description.abstract"항-DNA 자가항체는 전신성 홍반성 낭창(SLE)의 유발에서 중요한 역할을 수행한다. 하지만 이러한 항체의 자가 면역질환에서의 잠재적인 표적물질과 병리학적인 역할은 아직 명확히 규명되어 있지 않다. 본 연구의 목적은 첫 번째로 항-DNA 자가항체의 DNA-절단 활성과 암세포와 정상세포에서의 세포독성을 분석하고 두 번째로 항체에 의한 세포사멸이 apoptosis를 통해 일어나는지 또한 어떠한 메카니즘이 관여하는지를 밝히고자 하는 것이다.

"
-
dc.description.tableofcontents"국문요약 ⅰ

차 례 ⅲ

그림차례 ⅴ

표 차례 ⅶ

Ⅰ. 서 론 1

Ⅱ. 재료 및 방법 3

A. 단클론 항-DNA 자가항체의 분리, 생산, 정제 및 확인 3

1. 세포배양 3

2. 단클론 항-DNA 자가항체의 생산 3

3. 항-DNA 자가항체의 정제 3

4. 정제된 항-DNA 자가항체 로부터의 Fab 생산 4

5. 정제된 G1-5 항체, Fab fragments의 SDS-PAGE 4

6. 항-DNA 자가항체의 DNA 결합 활성 측정을 위한 ELISA

(Enzyme-linked immunosorbent assay) 5

B. 암세포와 정상세포에 대한 항-DNA 자가항체의 세포독성 분석 5

C. 항-DNA 자가항체의 DNA 절단 활성 6

1. Plasmid cleavage (전기영동) 6

2. ALONA (affinity-linked oligonucleotide nuclease assay) 6

D. 항-DNA 자가항체로 유도되는 세포사멸의 메카니즘 분석 7

1. DNA fragmentation 7

2. Caspase 3의 활성 유무 관찰을 위한 Western blotting 8

3. 현미경 관찰 (phase-contrast microscope) 8

E. 항-DNA 자가항체의 세포 표면 결합과 세포질 혹은

핵의 localization 분석 9

1. 항체의 세포표면 결합 (FACS 분석) 9

2. 항체의 세포표면 결합 (형광현미경) 9

3. 항체의 세포질 혹은 핵의 localization (FACS 분석) 9

4. 항체의 세포질 혹은 핵의 localization (형광현미경) 10

Ⅲ. 결 과 11

A. 단클론 항-DNA 자가항체의 분리 정제 및 확인 11

B. 암세포와 정상세포에 대한 항-DNA 자가항체의 세포독성 분석 16

C. 항-DNA 자가항체의 DNA 절단 활성 20

D. 항-DNA 자가항체로 유도되는 세포사멸의 메카니즘 분석 25

E. 항-DNA 자가항체의 세포 표면 결합과 세포질 혹은

핵의 localization 분석 29

Ⅳ. 고 찰 36

Ⅴ. 결 론 38

참고 문헌 39

영문 요약 44



"
-
dc.language.isoko-
dc.titleCytotoxicity and DNA cleaving activity of Anti-DNA Autoantibody-
dc.title.alternative항-DNA 자가항체의 세포독성과 DNA 절단 능력-
dc.typeThesis-
dc.identifier.urlhttp://dcoll.ajou.ac.kr:9080/dcollection/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000000001276-
dc.subject.keyword항-DNA 자가항체-
dc.description.degreeMaster-
dc.contributor.department대학원 의학과-
dc.contributor.affiliatedAuthor이, 은정-
dc.date.awarded2006-
dc.type.localTheses-
dc.citation.date2006-
dc.embargo.liftdate9999-12-31-
dc.embargo.terms9999-12-31-
Appears in Collections:
Theses > School of Medicine / Graduate School of Medicine > Master
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